制膠時在凝膠溶液中放一個塑料梳子,在膠聚合后移去,形成上樣品的凹槽。水平式電泳,凝膠鋪在水平的玻璃或塑料板上,用一薄層濕濾紙連接凝膠和電泳緩沖液,或將凝膠直接浸入緩沖液中。由于pH值的改變會引起帶電分子電荷的改變,進而影響其電泳遷移的速度,所以電泳過程應在適當的緩沖液中進行的,緩沖液可以保持待分離物的帶電性質的穩(wěn)定。
初的支持介質是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質在實驗室已經應用得較少。在很長一段時間里,小分子物質如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙或纖維素、硅膠薄層平板為介質的電泳進行分離、分析,但目前則一般使用更靈敏的技術如HPLC等來進行分析。這些介質適合于分離小分子物質,操作簡單、方便。但對于復雜的生物大分子則分離效果較差。
電泳技術就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質以及分子本身大小、形狀等性質的差異,使帶電分子產生不同的遷移速度,從而對樣品進行分離、鑒定或提純的技術。 電泳過程必須在一種支持介質中進行。Tiselius等在1937年進行的自由界面電泳沒有固定支持介質,所以擴散和對流都比較強,影響分離效果。于是出現(xiàn)了固定支持介質的電泳,樣品在固定的介質中進行電泳過程,減少了擴散和對流等干擾作用。
操作注意事項
1.連接的氣壓不應大于145psi。
2.拆卸膠槍前,需先將氣壓管分離。
3.要操作順利,每次施工后,應用密封膠生產商建議的溶劑抹去槍管內剩余密封膠。(不允許將膠槍浸泡在溶劑中)
4.施工時,槍管前端蓋塞應經常緊閉。
5.施工完,請輕放膠槍,小心損傷前蓋和后端消聲器。
6.勿將槍口對準人。
7. 在連續(xù)工作過程中,膠槍每次停止工作時間一般不得超過5分鐘,否則,應打膠到膠排出完為止。
8.高壓膠管不得強行擠壓、彎曲,防止影響膠槍正常工作。